凡纳滨对虾养殖池塘及外河道中后生浮游动物群落结构差异及其影响因素

为了解凡纳滨对虾养殖对池塘后生浮游动物群落结构的影响，于2021年5月上旬至10月上旬在上海市奉贤区某养殖场及其外河道进行了16次调查，分析了后生浮游动物的物种组成及优势种、密度、生物量和生物多样性。共鉴定出后生浮游动物33种（轮虫23种、枝角类6种、桡足类4种），优势种6种（轮虫4种、枝角类1种、桡足类1种），其中针簇多肢轮虫（Polyarthra trigla）和广布中剑水蚤（Mesocyclops leuckarti）为养殖塘和外河道共同优势种。Jaccard相似性分析表明，养殖塘与外河道后生浮游动物物种组成整体上处于中等相似水平。总体上养殖塘后生浮游动物密度、生物量、优势种数和多样性指数均高于外河道。养殖塘和外河道中Shannon-Wiener多样性指数H''均值分别为1.56±0.48和1.55±0.34，表现为中度污染；Gleason-Margalef物种丰富度指数D均值分别为0.81±0.32和0.76±0.33，表现为重度污染；养殖塘总体处于中度富营养水平，外河道水体则处于轻度富营养水平。Pearson相关性分析表明，养殖塘后生浮游动物群落结构与水温（WT）、总氮（TN）、总磷（TP）、高锰酸盐指数（COD）和浮游植物中的隐藻门具有显著相关性，而外河道后生浮游动物群落分布与WT、溶解氧（DO）、叶绿素a（Chl.a）、COD、悬浮物（SS）和浮游植物中的隐藻门、裸藻门和甲藻门具有显著相关性。冗余分析（Redundancy analysis, RDA）表明，TP和COD是影响凡纳滨对虾养殖塘后生浮游动物群落结构的关键因子，而浮游植物中的隐藻属、DO、和TN则是影响外河道后生浮游动物群落的主要环境因子。研究结果表明凡纳滨对虾养殖池塘环境因子对后生浮游动物群落结构具有显著影响作用，且明显区别于外河道环境因子对后生浮游动物群落结构的影响，揭示了人工干预对虾养殖生产会显著改变天然水体中后生浮游动物群落结构及水质变化，对凡纳滨对虾的生态养殖和水质调控具有重要意义。     

鳗弧菌vah1缺失菌株构建及致病性评估

为了构建减毒鳗弧菌菌株,本文通过基因重组和Overlap PCR技术,敲除鳗弧菌中的毒力基因vah1,构建vah1缺失鳗弧菌菌株△vah1,缺失菌株△vah1的生长速率没有变化,溶血活性下降了9.5倍,生物膜形成能力下降。通过感染凡纳滨对虾,得出野生菌株的半数致死量为(3.16±0.8)×10_⁵ cfu/mL,缺失菌株△vah1的半数致死量为(9.77±0.5)×10_⁵ cfu/mL,缺失菌株的半数致死量提高了约3.09倍,在对虾体内的定植能力下降了约3倍左右,对凡纳滨对虾的肝胰腺细胞造成的溶解和空泡化的破坏程度下降了,引起凡纳滨对虾的免疫基因CAT、SOD、PO、LZM、ACP的表达水平低于野生菌株。△vah1鳗弧菌菌株为后续减毒疫苗菌株或抗鳗弧菌特异性免疫增强剂制备奠定基础。     

凡纳滨对虾二氧化碳麻醉后有水保活运输条件优化

为提高凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）在二氧化碳（Carbon dioxide，CO2）麻醉后有水运输过程中的存活率，研究了（麻醉阶段）CO2流速、（浸泡阶段）浸泡时间、（复苏阶段）水体类型和盐度对复苏效果的影响。设置CO2流速（3 L/min、5 L/min和7 L/min）、浸泡时间（0 min、1 min和5 min）、水体类型（自来水、养殖水上清液和养殖水）以及盐度（3 ‰、7 ‰和11 ‰）4因素，进行单因素试验，并以结果为依据进行L9(34) 正交和验证试验。单因素试验结果表明最佳CO2流速为7 L/min、最佳浸泡时间为0 min、最佳水体类型为自来水、最佳盐度为7‰；正交试验结果显示当复苏时间为2 h时，4种因子对运输效果的影响的主次关系为：浸泡时间>水体类型>盐度>CO2流速，最佳运输方式组合为：CO2流速8 L/min、水体类型为自来水、盐度为7‰、浸泡时间为0 min；当复苏时间为4 h时，4种因子对运输效果的影响的主次关系为：浸泡时间> CO2流速>水体类型>盐度，最佳运输方式组合为：CO2流速7 L/min、水体类型为自来水、盐度为7‰、浸泡时间为0 min；当复苏时间为6 h时，4种因子对运输效果的影响的主次关系为：浸泡时间> CO2流速>盐度>水体类型，最佳运输方式组合为：CO2流速6 L/min、水体类型为自来水、盐度为7‰、浸泡时间为0 min。研究结果证明，可通过调节CO2流速、浸泡时间、水体类型和盐度4种因素的水平，提高凡纳滨对虾在不同运输时长条件下的复苏率，为对虾保活运输提供了新的思路。     

3种抗冻剂处理对凡纳滨对虾冻融循环期间品质及营养变化影响

为评估蔗糖山梨醇、三聚磷酸钠与卡拉胶寡糖等3种抗冻剂处理对凡纳滨对虾冻融期间的抗冻保水效果，分析其营养及风味变化，将新鲜样品分别在30 g/L的蔗糖山梨醇（Sucrose sorbitol, SS）、30 g/L三聚磷酸钠（Sodium tripolyphosphate, ST）与30 g/L卡拉胶寡糖（Carrageenan oligosaccharides, CO）溶液中浸渍处理2 h，以无菌水浸渍处理2 h为对照组（CK）。样品经聚乙烯（Polyethylene, PE）袋包装后冻藏。期间，实验模拟了凡纳滨对虾流通期间的6次冻融循环，分别以持水力（Water holding capability, WHC）、Ca2+-ATPase活性、核磁成像（Magnetic resonance imaging, MRI）与傅立叶变换红外显微成像(Fourier transform infrared imaging, FT-IRI)为评价指标，同时结合基本营养成分与氨基酸分析，综合评价3种抗冻剂处理对冻融凡纳滨对虾的保水效果及品质变化影响。结果得出，与SS、ST处理相比，CO处理能有效延缓冻融样品的WHC、Ca2+-ATPase活性与基本营养成分下降；由氨基酸分析得出，冻融会使样品中的游离氨基酸含量发生变化，卡拉胶寡糖处理组样品冻融期间的鲜甜味氨基酸、必需氨基酸与氨基酸总量均保持在较高水平；MRI与FT-IRI分析可直观反映冻融凡纳滨对虾的蛋白含量变化与水分迁移状况。可见，卡拉胶寡糖处理对冻融凡纳滨对虾的蛋白质、脂肪与水分的保护作用效果明显，其能在发挥良好抗冻保水效果的同时，较好延缓凡纳滨对虾冻融期间的营养成分降低与品质劣变。     

4种饵料对选育中间养成阶段的凡纳滨对虾投喂效果分析

为了解凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）在选育保种中间养成阶段（约10 ~40g/尾）的营养需求，以同一全同胞家系的凡纳滨对虾为对象，体质量为（10.30±1.61）g，选择配合饲料、软颗粒饲料、虎斑乌贼（Sepia pharaonis）和双齿围沙蚕（Perineresis aibuhitensis）这4种饵料进行60d的投喂试验，在对4种饵料进行营养评价的基础上，研究其对对虾生长、成活，以及消化、生长相关基因表达的影响。结果显示：（1）4种饵料投喂下对虾的特定生长率和成活率从高到低依次为双齿围沙蚕、配合饲料、软颗粒饲料和虎斑乌贼；（2）人工饲料组对虾肝胰腺中消化相关的α-淀粉酶d4基因表达水平显著高于生物饵料组（P<0.05），蛋白酶基因表达趋势同α-淀粉酶d4基因相似，双齿围沙蚕组和软颗粒饲料组的胰脂肪酶基因表达显著高于配合饲料组（P<0.05）。虎斑乌贼组小核核糖核蛋白多肽基因表达显著低于其他饵料组（P<0.05），生物饵料组y+L氨基酸转运载体-2基因表达显著高于人工饲料组（P<0.05）；（3）虎斑乌贼和双齿围沙蚕的氨基酸营养评价相对较高，而配合饲料和双齿围沙蚕的脂肪组成和含量相对更优。研究发现：双齿围沙蚕的营养价值最高，软颗粒饲料最低；4种试验饵料的投喂效果依次为双齿围沙蚕、配合饲料、软颗粒饲料和虎斑乌贼；除蛋白酶基因外，其他基因表达同试验饵料的营养组成和投喂效果一致。